Пожалуй, самый главный вопрос будущих родителей — это вопрос о продолжительности хранения клеток пуповинной крови без утраты жизнеспособности. Вопрос, безусловно, важный и правомерный, ведь банки предлагают приобрести страховку на будущее, и речь идет о здоровье ребенка и членов семьи.
Мировое научное сообщество постоянно «мониторит» эту проблему, начиная с 90-х годов 20-го века. Для этого специальные тестовые образцы клеток через определенные интервалы времени достают из криохранилища, размораживают, «отмывают» от криопротектора и проводят ряд анализов.
Ключевые — это колониеобразование и пересадка иммунодефицитным мышам. Первый анализ проводят в чашках Петри, используя специальные среды и инкубаторы. Оценивают (количественно) дифференцировку кроветворных стволовых клеток в основные клеточные типы крови: эритроциты, лейкоциты и тромбоциты, моделируя приживление трансплантата онкобольным после облучения и химиотерапии. Второй тест проводят на линии мышей NOD/SCID c иммунодефицитом (животные с диабетом без ожирения, у которых иммунодефицит характеризуется отсутствием Т-, В- и NK-лимфоцитов), анализируя восстановление кроветворения после инъекции клеток.
На сегодняшний день время хранения пуповинной крови без утраты основных физиологических функций составляет более 24 лет. Однако вопрос эффективности пересадки человеку в зависимости от длительности хранения пуповинной крови остается закрытым лишь отчасти.
Немного истории, или как все начиналось
Первая трансплантация клеток пуповинной крови была проведена в Париже в 1988 году мальчику, больному анемией Фанкони. Она стала возможной благодаря титанической работе трех групп исследователей. Хол Броксмейер скрупулезно проанализировал количество и потенциал кроветворных клеток-предшественников пуповинной крови. Элиан Глюкман была и остается ведущим специалистом по терапии анемии Фанкони. Доктор Ауэрбах провела огромную подготовительную работу. Среди матерей, чьи дети были больны анемией Фанкони, она отобрала беременных; среди них, в свою очередь, с помощью специальных тестов она выявила тех, чьи будущие дети не несли признаков болезни и полностью совпадали по тканесовместимости с больными братьями или сестрами. Таких женщин оказалось пятеро. Когда одна из них родила дочку, пуповинную кровь собрали, выделили из нее стволовые клетки и ввели больному брату после химиотерапии, уничтожившей «больной» костный мозг. С тех пор минуло 27 лет. Мэтью Фарелл – первый пациент, получивший инъекцию клеток пуповинной крови, жив и здоров. Кстати сказать, кровь брата и сестры теперь полностью совпадает.
В последнем номере журнала Bone Marrow Transplantation (N. Kurita, F. Frassoni, S. Chiba, M. Podestà. Impact of length of cryopreservation and origin of cord blood units on hematologic recovery following cord blood transplantation) впервые ретроспективно оценены результаты трансплантаций пуповинной крови 127 онкогематологическим больным. Анализировали длительность хранения образцов в замороженном состоянии в условиях ультранизких температур, а также удаленность банка пуповинной крови от центра трансплантации. Последнее вполне понятно: ведь транспортировка стволовых клеток, пусть даже в специализированных емкостях (так называемых «сухих перевозчиках») — значительный стресс для биоматериала. Из 127 единиц пуповинной крови 42 хранились в замороженном состоянии от 5 до 12 лет, а 44 — транспортировались на значительные расстояния. Установлено, что криозамораживание и оттаивание, а также продолжительность транспортировки не отражаются ни на качестве клеток, ни на приживлении нейтрофилов (их восстановление свидетельствует о начале приживления трансплантата). По мнению авторов исследования, лишь количество CD 34-положительных предшественников перед замораживанием может считаться предиктором эффективности трансплантации.
Дугина Т.Н., начальник лаборатории ООО «КриоЦентр», канд.биол.наук.